Asopis Veterinární věda Kubáně: Hormonální regulace reprodukční funkce krav a jalovic
Tato „hrůza“ se zpravidla rodí z nevědomosti o tom, jak otelit krávu a jak ji podojit, aniž by to poškodilo její zdraví. O tom a mnohem více si povíme v tomto článku.
Normální březost u krávy trvá 280-285 dní (s výkyvy ± 1-23 dní). Znáte-li datum inseminace zvířete, můžete snadno vypočítat očekávané datum otelení.
Místnost, ve které bude telení probíhat, musí být předem připravena. 10 dní před otelením je nutné chlév důkladně vyčistit, vybílit a zajistit zvířeti vydatnou podestýlku. Právě v tomto období začínají sledovat stav zvířete, zejména stav mléčné žlázy. Při zjištění nadměrného otoku vemene nebo příznaků mastitidy se část mleziva několikrát dojí a vemeno se masíruje kafrovým olejem.
Když se objeví známky blížícího se porodu – strach, zvíře se dívá na žaludek, bučí, často si lehá, vazy po stranách kořene ocasu se uvolňují, měknou, zevní genitál otékají, uvolňuje se hlen z pochvy, objevuje se mléko – vnější genitálie a zadní končetiny se promyjí 0,1% roztokem manganistanu draselného. Při běžném telení, které obvykle netrvá déle než 30-50 minut, není potřeba krávě poskytovat žádnou pomoc. Pokud je plod velký a je nutné poskytnout asistenci, pak lýtko při tlačení táhneme paralelně s pánevními končetinami, s námahou maximálně 2-3 osob. Pokud plod nevyjde do 50-60 minut po prasknutí plodové vody, musíte zavolat veterináře!
Tele by mělo být přijato na čisté pytlovině, pod kterou je položena suchá sláma. Pupeční šňůra, pokud se nepřetrhla, se odstřihne čistými dezinfikovanými nůžkami ve vzdálenosti 10-12 cm od břicha a konec pupeční šňůry se namaže jódem nebo brilantní zelení. Pomocí čistého hadříku odstraňte hlen z nosu, dutiny ústní a uší novorozence. A teprve potom nechají krávu olizovat novorozeně. 30-40 minut po otelení se vemeno matky omyje teplou vodou, podojí se první proud mleziva, vyloučí se mastitida a teprve potom se tele připustí. Doba od narození telete do prvního vypití mleziva by neměla přesáhnout 2 hodiny! Poté, co má tele dost, je kráva podojena. První týden se kráva dojí 4-5krát denně a poté se přechází na dojení třikrát denně.
V tomto období je důležité věnovat zvýšenou pozornost krmení, aby nedošlo k poporodním onemocněním! Pamatujte, že nemoc se neobjevuje bezdůvodně! Základem všech onemocnění poporodního období je zpravidla porucha metabolismu v důsledku nesprávného krmení. Projevuje se to již v průběhu porodu, kdy je zvíře v extrémním stresu natolik náchylné na nepříznivé faktory prostředí, že to někdy končí i smrtí. Pro snížení negativního dopadu porodního stresu na další produktivitu a reprodukci je nutné saturovat organismus zvířete po otelení energií, bílkovinami, cukry, minerály a vitamíny, aby nedocházelo k rozvoji porodních paréz, zadržené placenty, ketóze a mastitidě.
Přestože tato onemocnění zná každý majitel, bohužel ve 30 % případů riziko jejich výskytu vždy existuje! Po otelení je proto nutné poskytnout zvířeti dobré seno, teplou vodu s UVMKK „Felucen“ (energetický koktejl), který je zdrojem lehce stravitelných bílkovin, cukru, soli, mikroprvků a vitamínů A, D, E a skupina B.
Ve dnech 2-3 po otelení se do stravy zavádějí zpravidla pšeničné otruby do 1-1,5 kg ve formě kaše a zavádějí se energetické krmné přísady bohaté na cukry, minerály a vitamíny, například UVMKK “Felucen “ – energie. Včasné zavedení minerálů a vitamínů je životně důležité, protože se začátkem dojení se zvyšuje jejich odstraňování z těla zvířete, což může ovlivnit jak produktivitu, tak zdraví krávy. Proto 2.-3. den zařazujeme do jídelníčku krávy UVMKK „Felucen“ – energie, jako zdroj energie, minerálů a vitamínů. A od 4-5 dnů po otelení se dávka koncentrátů zvyšuje na 2-2,5 kg za den, přidáváním 2-3 g každé 350-400 dny, dokud se nezvýší dojivost a postupně se zavede šťavnaté krmivo (siláž, okopaniny).
Je třeba mít na paměti, že po otelení by se práce s krávou měla omezit na zásadu – “Neubližovat!” Každý majitel proto musí věnovat velkou pozornost krmení a údržbě, aby se tělo krávy nestalo „cílem“ nemocí!
Úvod. Vznik velkých mléčných farem a specializovaných komplexů ostře odhalil problém reprodukce skotu. Měnící se podmínky chovu, krmení, péče a další faktory způsobují metabolické poruchy, funkce hypotalamo-hypofyzárního systému, neurohormonální regulaci v těle a v důsledku toho dysfunkci reprodukčních orgánů zvířat, což s sebou nese snížení jejich plodnosti a mléčné produkce.
Studium endokrinních poruch při dysfunkci pohlavních žláz, vliv faktorů prostředí, hormonálních léků na jejich endokrinní a generativní funkce, jakož i účinnost užívání různých léků k obnovení plodnosti a zvýšení plodnosti zvířat je proto naléhavým úkolem veterinární vědy a praxe.
Cílem této práce bylo studovat vliv přírodních faktorů a hormonálních přípravků na endokrinní funkci hypotalamo-hypofyzárního systému a určit jejich účinnost při regulaci reprodukční funkce zvířat. V souladu s tím byly stanoveny následující úkoly k řešení:
1. Studovat vliv gonadotropin uvolňujícího hormonu, prostaglandinů a progesteronu na steroidní produkci vaječníků a projevy pohlavního cyklu u krav.
2. Stanovit možnost provedení umělé inseminace krav a jalovic ve stanoveném čase, což zlepší organizaci práce na farmě.
Pro diagnostiku funkčních poruch pohlavních orgánů byla provedena klinická a porodnicko-gynekologická vyšetření zvířat, zohledněny byly anamnestické údaje, záznamy v inseminačních a porodních denících, analyzováno bylo krmení, údržba, provoz a technologie inseminace zvířat. Vyšetřeny byly všechny krávy, které nezačaly říhat 25–30 dní po otelení, jalovice jeden měsíc po dosažení fyziologické zralosti (ve 15–18 měsících dosahující 70 % živé hmotnosti dospělých krav stejného plemene), a také krávy, které opakovaně (3krát a vícekrát) začaly říhat. Při gynekologickém vyšetření byla pozornost věnována stavu pochvy, dělohy a vaječníků, jejich velikosti, tvaru, konzistenci, reakci dělohy na masáž, přítomnosti či nepřítomnosti folikulů, žlutých tělísek, cyst ve vaječnících.
Diagnóza funkčního perzistujícího žlutého tělíska byla provedena dvojitým rektálním vyšetřením krav s intervalem 2-3 týdnů. V tomto případě žluté tělísko výrazně vyčnívá nad povrch vaječníku, nemění se jeho umístění, objem a konzistence.
Obr. 1. Žluté tělísko na pravém vaječníku
Délka přítomnosti žlutého tělíska ve vaječníku závisí na stavu vajíčka. Po oplodnění vajíčka žluté tělísko vaječníku bujně roste a zůstává v těle krávy po celou dobu březosti. Vstřebávání žlutého tělíska v březosti u krav nastává 14–16 dní po normálním porodu. Největší velikosti dosahuje v 5.–7. měsíci březosti a poté se jeho velikost postupně zmenšuje.
Pokud nedojde k oplodnění vajíčka, vytvoří se na místě prasklého folikulu také žluté tělísko, které však zůstává ve vaječníku krávy pouze během pohlavního cyklu a obvykle do fáze excitace dalšího cyklu na jeho místě zůstanou pouze zbytky v podobě bělavé jizvy.
Důvody zadržování žlutého tělíska ve vaječníku nejsou dostatečně jasné, často je nemožné zjistit, proč se žluté tělísko těhotenství nebo cyklu nerozpouští, ale zůstává v gonádě po neurčitou dobu.
Mnoho badatelů označuje žluté tělísko za patologické, pokud zůstává ve vaječníku déle než dva pohlavní cykly, zatímco A. P. Studentsov označuje žluté tělísko za perzistující, pokud zůstává ve vaječníku nebřezí krávy déle než 25–30 dní.
V etiologii perzistujícího žlutého tělíska lze rozlišit vliv nepříznivých faktorů existence krav a rozvoj patologických procesů v různých orgánech. Kromě toho někteří autoři vysvětlují zpoždění resorpce žlutého tělíska vysokou mléčnou produktivitou a označují ho jako „laktační“ žluté tělísko. Šipilov VS (1968) spojuje retenci žlutého tělíska ve vaječníku s vynecháním další říje.
Perzistující žluté tělísko je registrováno po těžkých porodech, retenci placenty, proto je tato patologie častěji pozorována u mladých krav po prvním a druhém otelení. Řada autorů považuje za příčinu retence žlutého tělíska abnormální funkci hypofýzy, hypofunkci jejího zadního laloku. To vysvětluje relapsy u 30 % krav.
Výzkum D.E. Kachura (1975) a dalších vědců prokázal, že obsah progesteronu v krvi krav s perzistujícím žlutým tělískem byl nižší ve srovnání s kravami se žlutým tělískem v březosti nebo pohlavním cyklu [1, 2, 6, 7].
Toto množství progesteronu v krvi krav s perzistujícím žlutým tělískem je však dostatečné k potlačení funkce hypotalamo-hypofyzárního systému a zastavení zrání folikulů.
Klinické příznaky perzistujícího žlutého tělíska u krav jsou spojeny s poruchami pohlavního cyklu způsobenými změnami v jeho hormonální funkci. Nejčastěji se tato porucha projevuje úplným útlumem funkce vaječníků, méně často nedostatečností ve formě anovulačního pohlavního cyklu. Při anovulačním pohlavním cyklu jsou krávy v říji a estru, ale jejich inseminace je neúčinná.
Řada výzkumníků uvádí, že krávy s perzistujícím žlutým tělískem (corpora lutea) byly inseminovány po dobu 4–6 měsíců, ale k oplodnění nedošlo, ačkoli u některých krav byla pozorována říje a říje. Celkový stav krávy je obvykle uspokojivý. Předpokládá se však, že perzistující žluté tělísko v průběhu cyklu může způsobit změny v těle charakteristické pro skutečnou březost, které jsou zvláště výrazné po 2–3 měsících pobytu žlutého tělíska ve vaječníku. To se projevuje snížením dojivosti a změnou kvality mléka.
Perzistující žluté tělísko, které zůstává ve vaječníku nebřezího zvířete déle než 25–30 dní, se může vytvořit ze žlutého tělíska během březosti, pohlavního cyklu nebo z folikulu, který vzniká luteinizací bez ovulace [4].
Důvodem nízké účinnosti léčby krav s funkčními poruchami vaječníků byl nedostatek jasného pochopení patogeneze funkčních poruch pohlavních žláz a vlivu hormonálních léků na generativní a hormonální funkce pohlavních žláz.
Progesteron a jeho metabolické produkty – gestageny – zvyšují aktivitu specifických enzymů, které štěpí oxytocin a vasopresin – oxytocinázu a vasopresinázu. Progesteron navíc snižuje citlivost děložních svalů na estrogeny, oxytocin a vasopresin, čímž snižuje expresi odpovídajících receptorů v myometru.
V buňkách endometria indukuje 17β-hydroxysteroid dehydrogenázu, klíčový enzym v metabolismu estradiolu, a přeměňuje ji na estron s nízkou aktivitou. Snižuje také obsah prostaglandinů v myometriu, čímž snižuje syntézu a zvyšuje aktivitu enzymů zodpovědných za jejich odbourávání. Gestageny snižují citlivost myometria na kontraktilní působení serotoninu a histaminu a současně zvyšují expresi β-adrenoreceptorů v myometriu, které mají „inhibiční“, děložně relaxační účinek. V endometriu progesteron způsobuje proliferativní změny, které vytvářejí podmínky pro implantaci embrya. Vysoké koncentrace progesteronu blokují sekreci hypofyzárních gonadotropních hormonů (FSH a LH), které hrají zásadní roli v regulaci folikulogeneze, vývoje vajíček a projevu známek pohlavního lovu. FSH vede k syntéze estrogenů ve folikulu, které zvýšením počtu receptorů pro FSH podporují jeho akumulaci, další zrání folikulů a zvýšení sekrece estradiolu; ostatní folikuly v této době podléhají atrézii [3, 5].
Při nízké hladině progesteronu (včasná lýza žlutého tělíska) dosahuje koncentrace estradiolu v krvi během preovulačního období maxima, což vede k uvolnění velkého množství gonadotropin uvolňujícího hormonu. Následuje vrchol preovulačního zvýšení LH a FSH, stimulujícího prasknutí Graafova folikulu (s optimálním poměrem FSH a LH přibližně 1:10), dochází k ovulaci a tvorbě žlutého tělíska. Vysoká hladina estrogenů navíc přispívá k projevům vnějších známek pohlavního lovu (vzrušení, říje atd.), což usnadňuje detekci říje u krav.
Hlavním důvodem vysoké hladiny progesteronu během období inseminace je neúplná lýza žlutého tělíska, kdy je blokující účinek na hypofýzu odstraněn a dominantní folikul se vyvíjí, ale koncentrace zůstává dostatečná ke snížení tonusu dělohy a
potlačení preovulačního vrcholu LH, což ovlivňuje včasnou ovulaci folikulu.
Neúplná lýza žlutého tělíska je způsobena nedostatečným množstvím prostaglandinu F2a (u latentních a subklinických forem endometritidy) nebo receptorů v luteálních buňkách (nízké hladiny karotenu a některých mikroelementů). Kromě toho může hladina progesteronu zůstat vysoká při použití nedostatečných schémat pro indukci a synchronizaci pohlavního lovu, nedodržení časových intervalů mezi podáváním léků a inseminací zvířat, jakož i při použití nekvalitních léků.
Experimentální testování této metody jsme provedli v letech 2014-2016. V důsledku zpracování 121 krav vykázalo 84,5 % zvířat plnou pohlavní říji. Během dubna 2015 všechna zvířata podrobená indukci a synchronizaci s následnou plodnou inseminací porodila a bylo získáno 83 živých telat, tj. výtěžnost telat byla 80,1 % na 100 krav. Je třeba poznamenat, že před našimi studiemi byla hrubá výtěžnost telat na 100 krav 54 %.
V letech 2015-2016 byl proveden podobný produkční experiment zaměřený na indukci a synchronizaci pohlavního cyklu u 257 krav. Z 257 krav podrobených indukci a synchronizaci pohlavního cyklu s následnou umělou inseminací vykázalo 207 zvířat plnou pohlavní říji a bylo oplodněno. V dubnu až květnu 2015 porodilo 198 zvířat, přičemž výtěžnost telat na 100 krav byla 77,1 %. Dříve tato farma dostávala průměrně 56 telat na 100 krav, proto tato metoda umožnila zvýšit výtěžnost telat o 21,1 %. Z 257 krav podrobených indukci a synchronizaci nevykazovalo 50 zvířat plný pohlavní cyklus, což je podle našeho názoru spojeno s vlivem dominantního mléka na reprodukční funkci. Alimentární potraty byly diagnostikovány u 8 krav.
Pozitivní výsledky dosažené aplikací komplexního schématu (metody) indukce a synchronizace pohlavního cyklu u krav nám dávají důvod doporučit jej k širokému praktickému využití při zrychlené (rozšířené) reprodukci stáda v chovu skotu. Umožňuje krátkodobé provedení totální umělé inseminace zvířat, kompaktní (turnajové) otelení v nejpříznivějších a nejziskovějších obdobích (sezónách) pro farmu a významné zvýšení užitkovosti telat.
Pro široké zavedení této metody v mléčných farmách je nutné mít dostatečný počet zdravých zvířat s normální reprodukční schopností. Při vytváření skupin krav pro indukci a synchronizaci pohlavních funkcí je vhodné používat zvířata s průměrnou a vyšší tučností, a to po 2 měsících od otelení.
Vysokého terapeutického účinku u funkčních poruch vaječníků u krav lze dosáhnout pouze diferencovaným použitím gonadotropních, progestogenních a dalších léků. Mnoho synchronizačních hormonálních léků dosud nezískalo povolení k neomezenému použití. Prostaglandin samotný i v kombinaci s uvolňovacím hormonem lze použít k účinné kontrole pohlavních cyklů u zdravého skotu, aniž by byla narušena jeho plodnost nebo zdraví obecně.
Dávky, frekvence a schémata jejich použití závisí na konkrétním stavu sexuálních funkcí. V tomto ohledu musí veterinární specialisté ovládat metody gynekologického vyšetření zvířat.
V závislosti na diagnóze stanovené během gynekologického vyšetření zvířat byly studovány následující metody použití hormonálních a jiných léků k regulaci sexuálních funkcí u krav s funkčními poruchami vaječníků.
Krávam s funkčními perzistujícími žlutými tělísky byl parenterálně podáván uvolňovací hormon, druhý den a po dobu 5 dnů jim bylo intramuskulárně injikováno 50 mg přírodního progesteronu (2 ml 2,5% olejového roztoku) a po dvou dnech jim byl podán prostaglandin v dávce 2 ml.
Exogenní progesteron, působící na hypotalamo-hypofyzární systém, snižuje nebo zastavuje funkční aktivitu žlutého tělíska a prostaglandiny podávané na tomto pozadí aktivují růst, zrání a ovulaci folikulů. Takové kombinované použití progesteronu a prostaglandinů umožňuje oplodnění 70–75 % zvířat během jednoho měsíce oproti 5–7 % v kontrole. Podání samotného progesteronu v optimálních dávkách na pozadí fungujícího žlutého tělíska nezajišťuje zrání a ovulaci folikulů. Dochází k cystické atrézii folikulů. Kombinované použití hormonů a prostaglandinů je účinné pro synchronizaci pohlavního lovu bez ohledu na fázi pohlavního cyklu, ve které se zdravá zvířata v době jejich zavedení nacházejí [5].
Užívání těchto léků v rané fázi cyklu (1.–7. den) potlačuje vývoj žlutého tělíska, což vede k rychlému poklesu produkce progesteronu. Podávaný progesteron neumožňuje vaječníkům zahájit nový cyklus, dokud není jeho podávání ukončeno.
Užívání progesteronu po 7. dni pohlavního cyklu nezpůsobí regresi žlutého tělíska. Nicméně v době, kdy je jeho podávání ukončeno, dojde k přirozené regresi žlutého tělíska u zvířat, která se nacházela v druhé polovině pohlavního cyklu, a u těch, která se nacházela v první polovině, dojde k jeho regresi v reakci na podání prostaglandinu. Podávaný progesteron proto opět oddálí nástup pohlavní říje u zvířete.
S pomocí navrhovaného programu lze tedy zpracovat všechna zvířata s cykly bez ohledu na fázi, ve které se nacházela při zahájení. Tento program umožňuje provádět inseminaci na základě známek pohlavní říje nebo ji využít pro synchronní umělé oplodnění.
Intenzifikace reprodukce a prevence neplodnosti u skotu spolu s přirozenými faktory regulace a stimulace sexuálních funkcí (kompletní krmení, aktivní pohyb) zahrnuje použití prostaglandinů a hormonálních přípravků, které jsou vysoce účinnými stimulanty v případě poruch sexuálních funkcí způsobených funkčními poruchami vaječníků v podobě perzistující nebo snížené funkce žlutého tělíska. Synchronizační program s využitím hormonů a prostaglandinů lze zahájit, když se skot nachází v jakékoli fázi pohlavního cyklu. Kombinace přirozeného progesteronu, gonadotropin uvolňujícího hormonu a prostaglandinů umožňuje dosáhnout komprimovaného programu synchronizace pohlavního lovu a ovulace.
- Nazarov M.V. Příručka porodnictví, gynekologie a biotechniky reprodukce zvířat / M.V. Nazarov, E.V. Iljinský, A.N. Trošin, V.N. Ševkoplyas // Učebnice – Krasnodar, 2016. – s. 435-440.
- Varenikov M.V. Účinnost inseminace zvířat závisí na hladině progesteronu / M.V. Varenikov, V.L. Liepa, V.I. Turchina // Veterinární věda. 2014. – s. 42-44.
- Lobodin K.A. Placenta – aktivní složka pro korekci reprodukční funkce u krav / K.A. Lobodin // Veterinární věda. – 2006. — č. 7. — s. 38-41.
- Porfirjev I.A. Neplodnost vysoce produktivních dojnic / I.A. Porfirjev // Veterinární věda. – 2006. – č. 10. – s. 39-42.
- Postovoy S.G. Vliv přípravků prostaglandinu F 2-alfa na kontraktilní funkci dělohy u krav / S.G. Postovoy // Veterinární věda. – 2007. – č. 4. s. 36-38.
- Sodek Z., Dymarski I., Piekarska O. Analýza dlouhosrstého stáda a důvody vyřazení dojnic ze stáda ZZD IZ Pawlowice // ACTA Scientiarum Polonorum. 2005/ V. 4. Č. 2. R. 97-112.
- Stevenson JS, Phatak AP Inseminace v době říje indukované dy presynchrózy před aplikací synchronizované říje a ovulace // J. Dairy Sci. 2005. V. 88. P. 399-405.
Abstrakt. Jsou prezentovány mechanismy vlivu hlavních pohlavních hormonů na pohlavní cyklus krav a jalovic a účinnost jejich inseminace. Je studována účinnost přípravků gonadotropin uvolňujícího hormonu, prostaglandinů a progesteronu používaných k vyvolání říje. Kombinované užívání hormonů a prostaglandinů je účinné pro synchronizaci pohlavní říje bez ohledu na stádium pohlavního cyklu, ve kterém se zdravá zvířata mohou nacházet v době jejich zavedení. Důvody zadržení žlutého tělíska ve vaječníku jsou velmi rozmanité. Výsledky studií naznačují, že existuje obzvláště úzký vztah mezi žlutým tělískem a stavem dělohy. Při různých zánětlivých procesech v endometriu, myometru, jejich poranění, při zadržení placenty nebo částí macerovaného plodu a obecně při přítomnosti jakéhokoli obsahu v děloze se žluté tělísko může nacházet ve vaječníku. Podle výsledků vlastního výzkumu při subinvoluci dělohy u krav dochází k luteinizaci vyvíjejících se folikulů, které se mohou transformovat na perzistující žluté tělísko, což způsobuje dlouhodobou anafrodézu. Výzkum potvrdil, že v přítomnosti perzistujícího žlutého tělíska anamnestické údaje naznačují úplné zastavení pohlavních cyklů. Anatomická a histologická struktura perzistujícího žlutého tělíska, a tedy i jeho klinické příznaky, se neliší od příznaků žlutého tělíska daného cyklu. Jediná studie proto neposkytuje důvod k odlišení perzistujícího žlutého tělíska od žlutého tělíska daného cyklu. Taková diagnostika je možná pouze dvojnásobným vyšetřením s 3-4týdenním intervalem. Neplodnost však narušuje plány chovu, proto jsou pro její rychlé odstranění nutné různé léčebné metody. Řada autorů doporučuje použití prostaglandinu F12a (estrofan, estufalon atd.), progesteronu v kombinaci s gonadotropinem. Tyto léky, které mají menší terapeutický účinek než použití přírodních faktorů, by měly být používány striktně podle pokynů.
Klíčová slova: gonadotropin uvolňující hormon, prostaglandiny, progesteron, pohlavní cyklus, hypotalamo-hypofyzární systém, perzistující žluté tělísko, cysty, folikuly, vajíčko, anovulace, pohlavní lov, endometritida, dysfunkce pohlavních žláz, umělé oplodnění, reprodukce, fyziologická zralost.
Informace o autorech:
Nazarov Michail Vasiljevič, doktor veterinárních věd, profesor, vedoucí katedry anatomie, veterinárního porodnictví a chirurgie, Federální státní rozpočtová vzdělávací instituce vyššího vzdělávání „Kubánská státní agrární univerzita pojmenovaná po I. T. Trubilinovi“; 350044, Krasnodar, Kalinina ulice 13.
Griň Vladimir Anatoljevič, kandidát veterinárních věd, vedoucí státní rozpočtové instituce Krasnodarského kraje “Veterinární oddělení města Krasnodar”; 350910, Krasnodar, ul. Karasunskaja, 110; tel.: 8-861-2602794; e-mail: [email protected].
Za korespondenci s redakční radou odpovídá: Jevgenij Anatoljevič Gorpinčenko, PhD veterinárních věd, docent katedry terapie a farmakologie, Kubáňská státní agrární univerzita I. T. Trubilina; 350044, Krasnodar, ul. 70 Let Oktyabrya, budova 17, byt 70; e-mail: [email protected].