Analýza Toxoplasma gondii (PCR), č. AN321KR pro domácí mazlíčky, kočky a psy v Moskvě

Toxoplasma gondii je kokcidie, která je celosvětově nejčastějším parazitem teplokrevných živočichů.

1. Příprava pacienta
2. Indikace a kontraindikace
3. Interpretace a forma výstupu výsledku

Konečnými hostiteli parazita jsou kočky, v jejichž tělech je ukončena pohlavní fáze vývoje (enteroepiteliální cyklus), po které se ve výkalech uvolňují oocysty odolné vůči faktorům prostředí. Vývoj sporozoitů uvnitř oocyst nastává během 1-5 dnů po jejich kontaktu s kyslíkem, při určité teplotě a vlhkosti, tento proces se nazývá sporulace. Po požití oocyst z nich vystupují sporozoity, které vstupem do gastrointestinálního traktu koček a mezihostitelů pronikají do krve a lymfy ve formě tachyzoitů. T. gondii může vstoupit do většiny savčích buněk a podstoupit asexuální reprodukci, dokud není buňka zničena. V přítomnosti imunitní odpovědi se replikace tachyzoitů zastaví a vyvinou se pomalu se dělící bradyzoity, které mohou přetrvávat v cystách v tkáních mimo střevo. Tyto tkáňové cysty se mohou tvořit v orgánech centrálního nerovného systému, svalech a vnitřních orgánech. Živí bradyzoité mohou přetrvávat v tkáňových cystách po celý život hostitelského zvířete. Séroprevalence T. gondii se liší v závislosti na faktorech, jako je životní styl a věk zvířete.

Enteroepiteliální cyklus vývoje probíhá pouze v těle definitivního hostitele, kočky. Předpokládá se, že většina koček je infikována požitím mezihostitelů infikovaných T. gondii. Bradyzoiti vystupují do lumen žaludku a střev z tkáňových cyst, poté pronikají do epiteliálních buněk tenkého střeva a následuje pět fází nepohlavního vývoje. Oocysty Toxoplasma mají kulatý nebo oválný tvar a velikost 10×12 mikronů, oocysty nalezené ve výkalech jsou nesporulované (neinvazivní). Po uvolnění do vnějšího prostředí a kontaktu se vzduchem a vlhkostí po dobu 1-5 dnů oocysty sporulují, každá obsahuje dvě sporocysty se čtyřmi sporozoity, které jsou invazivní formou.

Úplné dokončení enteroepiteliálního cyklu je možné během 3-10 dnů po požití tkáňových cyst.

Vývoj klinické formy toxoplazmózy je dán charakteristikou interakcí parazit-hostitel, kmenem toxoplazmy, přítomností imunosuprese a lokalizací tkáňových lézí. U infestací způsobených požitím tkáňových cyst nebo oocyst jsou první klinické příznaky spojeny s tachyzoitem indukovanou nekrózou střevní tkáně a související lymfoidní tkáně. Je také možné, že se T. gondii krví rozšíří do jiných orgánů než střeva (játra, plíce, kosterní svaly, oči) s následným rozvojem ložiskových nekrotických lézí. Klinický výsledek onemocnění je určen závažností poškození orgánů, především srdce, plic, jater a nadledvin. Ačkoli akutní diseminované infekce mohou být smrtelné, hostitelské zvíře nejčastěji přežije. U koček nedochází po expozici T. gondii k aktivaci klasické komplementové dráhy, což je jedinečná vlastnost definitivního hostitele. Přibližně tři týdny po invazi mizí tachyzoity z vnitřních orgánů a jsou lokalizovány v tkáňových cystách (ve formě bradyzoitů). Tato fáze onemocnění je spojena se systémovou imunitní odpovědí, která zajišťuje potlačení parazitémie. Tkáňové cysty mohou přetrvávat v těle hostitele po celý život. Když jsou tkáňové cysty zničeny, uvolněné bradyzoity mohou způsobit recidivu onemocnění během období imunosuprese, například během chemoterapie nebo terapie glukokortikoidy.

Důvod, proč v určitých případech vzniká klinická toxoplazmóza, není zcela jasný. V tomto případě hrají roli faktory jako věk, pohlaví, typ hostitelského zvířete, ale i stádium vstupu parazita do těla. Typicky se u postnatální infekce toxoplazmózou onemocnění vyskytuje v méně závažné formě než u infekce v prenatálním období. Stres může přispívat k aktivaci infekce T. gondii. Přítomnost komorbidit nebo imunosuprese může zvýšit vnímavost hostitele k infekci T. gondii, což je oportunní patogen.

Diagnostika toxoplazmózy vyžaduje správnou interpretaci výsledků klinických, cytologických, parazitologických, sérologických a PCR studií.

Stávající PCR testovací systémy umožňují detekovat DNA T. gondii ve výkalech nemocných zvířat a odlišit Toxoplasma od jiných patogenů. DNA T. gondii lze detekovat také ve vzorcích krve zdravých psů a koček, proto se PCR obvykle používá ve spojení s cytologickým, histopatologickým nebo sérologickým vyšetřením. Nejpřesnější diagnózu toxoplazmózy, doprovázené poškozením centrálního nervového systému, lze stanovit, když jsou v séru, plné krvi, ascitické tekutině nebo CSF ​​detekovány specifické protilátky proti T. gondii a pozitivní výsledky jsou získány z testování těchto vzorků pomocí PCR metoda.

Testovaný analyt: plná krev.

Příprava pacienta: není vyžadováno.

indikace: horečka, anorexie, hubnutí, zápal plic, rýma, kýchání, žloutenka způsobená hepatitidou nebo cholangiohepatitidou, myokarditida, zvracení, průjem, uveitida, slzení, svalová hyperestezie při palpaci, ztuhlost chůze, kulhání, neurologické příznaky, cystitida, dermatitida, novorozenecká ( transplacentární infekce), narození mrtvého plodu, vyblednutí koťat.

Kontraindikace: neznámý.

Způsob výběru biomateriálu: venepunkce.

Předanalýza:

1. Proveďte postup odběru krve.
2. Po přidání biomateriálu do zkumavky s fialovým uzávěrem (EDTA) opatrně zkumavku 6-7krát obraťte, aby se materiál promíchal s antikoagulantem.
3. Zmrazte ve svislé poloze při -17°C…-23°C.
4. Označte kontejner svým celým jménem. majitele a jméno zvířete.
5. Vyplňte doporučující formulář s uvedením kódu klienta.
6. Teplotní režim pro transport do laboratoře -17℃…-23℃ (červené balení)

Interpretace výsledku: výsledky studie obsahují informace pouze pro lékaře. Diagnóza se provádí na základě komplexního posouzení různých ukazatelů, dalších informací a závisí na diagnostických metodách.

Klinické příznaky u starších koček mohou vyplývat z rozšíření tachyzoitů po počáteční akutní expozici nebo reaktivaci chronické infikované infekce s uvolněním bradiozoitů po imunosupresi.

Formulář výsledku: kvalitativní metoda.

Detekce nebo nedetekce DNA Toxoplasma gondii v testovaném vzorku.

1. Craig E. Greene, MVDr., MS, DACVIM, INFEKČNÍ ONEMOCNĚNÍ PSA A KOČEK, ČTVRTÉ VYDÁNÍ
2. S. Vaden, D. Knoll, F. Smith, L. Tilley. Kompletní průvodce laboratorními a instrumentálními studiemi psů a koček.